混菌发酵制备茶籽多肽及其抗氧化作用.docx
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1、菌丝1块,打散后接入PDA培养基中,28, 160rmin的条件下振荡培养72h,作为种子液。解淀粉芽泡杆菌种子培养:从保存的菌种斜面挑取1环PI142接至含30mLLB培养基的250mL锥形瓶中,28、200rmin振荡培养12h,作为PH42种子液。1. 3. 2混菌两段发酵工艺流程混菌两段发酵工艺流程如下:茶籽预处理(干燥、脱壳、粉碎至60目)一发酵培养基调配(主料茶籽、辅料葡萄糖)一接种UIM-281(装液量100mL250mL) I段发酵一接种P42f 段发酵f离心(10000rmin, 10min)一取上清液、粗分离一茶籽多肽1. 3. 3混菌发醉培养条件主效应因子筛选基于前期UI
2、M-281. PI142单因素发酵试验结果,设计Plackett-Burman试验对影响茶籽多肽产量的众多因素进行显著性筛选。入选的因素为:主料茶籽粉、辅料葡萄糖、UIM-281接种量、初始pH、I段发酵温度、I段发酵时间、PI142接种量、II段发酵温度、段发酵时间、摇床转速。每个因素取高(+1)、低(T)两水平。基于PB试验结果,设计最陡爬坡实验,对主效应因子进行水平寻优。1.3.4响应面优化试验根据PB试验和最陡爬坡试验结果,选取主效应因子为自变量,以多肽产量为响应值,设计三因素三水平响应面试验。1. 3. 2混菌两段发酵工艺流程混菌两段发酵工艺流程如下:茶籽预处理(干燥、脱壳、粉碎至6
3、0目)一发酵培养基调配(主料茶籽、辅料葡萄糖)一接种UIM-281(装液量100mL250mL) I段发酵一接种P42f 段发酵f离心(10000rmin, 10min)一取上清液、粗分离一茶籽多肽1. 3. 3混菌发醉培养条件主效应因子筛选基于前期UIM-281. PI142单因素发酵试验结果,设计Plackett-Burman试验对影响茶籽多肽产量的众多因素进行显著性筛选。入选的因素为:主料茶籽粉、辅料葡萄糖、UIM-281接种量、初始pH、I段发酵温度、I段发酵时间、PI142接种量、II段发酵温度、段发酵时间、摇床转速。每个因素取高(+1)、低(T)两水平。基于PB试验结果,设计最陡爬
4、坡实验,对主效应因子进行水平寻优。1.3.4响应面优化试验根据PB试验和最陡爬坡试验结果,选取主效应因子为自变量,以多肽产量为响应值,设计三因素三水平响应面试验。1. 3. 2混菌两段发酵工艺流程混菌两段发酵工艺流程如下:茶籽预处理(干燥、脱壳、粉碎至60目)一发酵培养基调配(主料茶籽、辅料葡萄糖)一接种UIM-281(装液量100mL250mL) I段发酵一接种P42f 段发酵f离心(10000rmin, 10min)一取上清液、粗分离一茶籽多肽1. 3. 3混菌发醉培养条件主效应因子筛选基于前期UIM-281. PI142单因素发酵试验结果,设计Plackett-Burman试验对影响茶籽
5、多肽产量的众多因素进行显著性筛选。入选的因素为:主料茶籽粉、辅料葡萄糖、UIM-281接种量、初始pH、I段发酵温度、I段发酵时间、PI142接种量、II段发酵温度、段发酵时间、摇床转速。每个因素取高(+1)、低(T)两水平。基于PB试验结果,设计最陡爬坡实验,对主效应因子进行水平寻优。1.3.4响应面优化试验根据PB试验和最陡爬坡试验结果,选取主效应因子为自变量,以多肽产量为响应值,设计三因素三水平响应面试验。1. 3. 2混菌两段发酵工艺流程混菌两段发酵工艺流程如下:茶籽预处理(干燥、脱壳、粉碎至60目)一发酵培养基调配(主料茶籽、辅料葡萄糖)一接种UIM-281(装液量100mL250m
6、L) I段发酵一接种P42f 段发酵f离心(10000rmin, 10min)一取上清液、粗分离一茶籽多肽1. 3. 3混菌发醉培养条件主效应因子筛选基于前期UIM-281. PI142单因素发酵试验结果,设计Plackett-Burman试验对影响茶籽多肽产量的众多因素进行显著性筛选。入选的因素为:主料茶籽粉、辅料葡萄糖、UIM-281接种量、初始pH、I段发酵温度、I段发酵时间、PI142接种量、II段发酵温度、段发酵时间、摇床转速。每个因素取高(+1)、低(T)两水平。基于PB试验结果,设计最陡爬坡实验,对主效应因子进行水平寻优。1.3.4响应面优化试验根据PB试验和最陡爬坡试验结果,选
7、取主效应因子为自变量,以多肽产量为响应值,设计三因素三水平响应面试验。1. 3. 2混菌两段发酵工艺流程混菌两段发酵工艺流程如下:茶籽预处理(干燥、脱壳、粉碎至60目)一发酵培养基调配(主料茶籽、辅料葡萄糖)一接种UIM-281(装液量100mL250mL) I段发酵一接种P42f 段发酵f离心(10000rmin, 10min)一取上清液、粗分离一茶籽多肽1. 3. 3混菌发醉培养条件主效应因子筛选基于前期UIM-281. PI142单因素发酵试验结果,设计Plackett-Burman试验对影响茶籽多肽产量的众多因素进行显著性筛选。入选的因素为:主料茶籽粉、辅料葡萄糖、UIM-281接种量
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- 发酵 制备 多肽 及其 氧化 作用