慢病毒感染protocol.docx

《慢病毒感染protocol.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《慢病毒感染protocol.docx（1页珍藏版）》请在第一文库网上搜索。

1、取对数生长期的待感染细胞铺入96孔板，设置复孔；2、用含10%胎牛血清的培养液稀释喋吟霉素成不同浓度，如lgml1.5gmk 2gml 2.5gmk 3gmh3、将含不同浓度嚎吟霉素的培养液，加入96孔板；4、37细胞培养箱培养5 7天后，视情况换液；5、观察96孔板中细胞的存活情况，以能杀死孔板中所有细胞的最低喋吟霉素浓度为最终筛选浓度。如果你的慢病毒是带有GFP筛选标志，执行以下方案荧光镜下细胞在感染病毒24h-72h后，会变绿，如果GFP阳性细胞3天有5%以上的细胞变绿，从6孔板大规模培养到大概1x10 7细胞数，拿出一半到免疫教研室分选，一般冻存（严格执行附件中有关细胞冻存的步骤）作为原种。Good Luck!张永国聂勇战提供，希望大家提出更新意见