常用染色液和试剂的配制.docx
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1、一、埃利希(EhrIiCh)氏苏木精染液先将苏木精2g溶于IOOm1乙醇中,再加冰醋酸IOm1,混合后加蒸储水IOOm1和IOOm1甘油,然后加硫酸铝钾(约Iog)至饱和,搅拌均匀,倒入瓶中。将瓶口用1层纱布包着小块棉花塞上,放在暗处通风的地方,并经常摇动促进“成熟”,直到液体颜色变为深红色为止。成熟时间约2-4周。若加0.4g碘酸钠可加快成熟。二、吉姆萨(GiemSa)氏母液将吉姆萨粉末Ig先溶于少量甘油,在研钵内研磨30min以上,至看不见颗粒为止,再将全部(66m1)剩余甘油倒入,于56温箱内保温2h。然后再加入甲醇(66m1),搅匀后保存于棕色瓶中。母液配制后放入冰箱可长期保存,一般刚
2、配制的母液染色效果欠佳,保存时间越长越好。临用时用PH6.8的磷酸盐缓冲液稀释10倍。三、瑞(Wright)氏染液称取瑞氏染料粉末OJg于研钵内研细后,加入少量甲醇再反复研磨,最后将全部甲醇(总共60m1)加入研匀,染料全部溶解后,将染液保存于棕色瓶内备用。四、醋酸洋红染液将洋红粉末Ig倒入IOOm145%醋酸溶液中,边煮边搅拌,煮沸(沸腾时间不超过30s),冷却后过滤,即可使用。也可再加入1%2%铁明矶水溶液5-10滴,至此液变为暗红色而不发生沉淀为止。如制作永久标本染色时,可加入饱和氢氧化铁或醋酸铁(媒染剂)溶液数滴,至染色液呈浅蓝色为止。五、硫堇染液(工作液)干液(硫堇):硫堇Ig或2g
3、溶于Ioom150%乙醇中,溶解后过滤备用;醋酸钠缓冲液:醋酸钠3H2O9.7g,巴比妥钠14.7g,溶于50Om1蒸储水中;0.1mo1/1盐酸;按:=40:28:32比例配成混合液,调pH5.70.2,即得硫堇工作液。六、0.02%盾纳斯绿B(JanusGreenB)用0.9%生理盐水溶液配制。七、甲基绿一派洛宁染液(Unna试剂)派洛宁0.25g,甲基绿0.15g,95%乙醇20m1,甘油20m1。将以上试剂混合溶解后用0.5%苯酚水溶液稀释至100m1o八、卡诺(Carnoy)氏液配方1:无水乙醇3份,冰醋酸1份,混匀即可。配方2:无水乙醇6份,冰醋酸1份,氯仿3份,混匀即可。九、酸性
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