酸性土壤速效磷试剂盒说明书.docx

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1、酸性土壤速效磷试剂盒说明书微量法100T/96S注意:正式测定之前选择23个预期差异大的样本做预测定。测定意义：速效磷是土壤中可被植物吸收的磷组分，包括全部水溶性磷、部分吸附态磷及有机态磷，土壤中速效磷是限制植物生长主要因子之一。测定原理：用双酸法提取酸溶性磷和吸附态磷，用铝镶抗比色法测定。自备实验用品及仪器：天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、震荡仪。试剂组成和配制：提取液：液体IoOm1X1瓶，49保存。试剂一：液体6m11支,4保存。试剂二：粉剂X1支，4C避光保存。临用前加2m1蒸储水溶解。用不完的试剂49保存。试剂三：粉剂x3支，4C避光保存。临用前加

2、Im1蒸储水溶解。现配现用。样本处理I新鲜土样风干，过30-50目筛，按照土壤质量(g)：提取液体积(m1)为1：510的比例(建议称取约0.1g土样，加入Im1提取液)，振荡提取30min,100g,25C离心IOmin,取上清液待测。测定步骤I1、取试剂三一支，加入Im1蒸储水充分溶解待用。2、显色液的配制(可测50个样)：取EP管一支，加入6601试剂一，再加入IOoiI1试剂二，充分混匀后，再加入2401试剂三，充分混匀待用：配好的显色液应为黄色，若变蓝则为磷污染：显色液必须现配现用；若一次性测不了50个样，可按比例缩小各试剂体积。3、操作表空白管测定管样本(1)40提取液(H1)40

3、显色液(1)2020H2O(1)140140充分混匀，25静置30min于微量石英比色皿/96孔板中，蒸饱水调零，测定66Onm处吸光值A,分别记为A空白管和A测定管，A=A测定管-A空白管。空白管只要做一管。计算公式，a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下标准曲线:y=0.1252-0.0041,R2=0.9957,X为标准品浓度(mg1),y为吸光值。速效磷含量(mgkg干重)=(A+0.0041)0.1252XV样(WXV样V样总)=7.987(A+0.41)WV样：样本体积，0.04m1；V样总：加入提取液体积，1m1,W：样本质量，约01gb.用96孔板测定的计算公式如下标准曲线：y=0.0626-0.0041,R2=0.9957,X为标准品浓度(mg1),y为吸光值。速效璘含量(mgkg干重)=(A+0.0041)0.0626V样(WXV样V样总)=15.97(A+0.41)WV样：样本体积，0.04m1：V样总：加入提取液体枳，1m1,W：样本质量，约6：Ig注意事项I1 .配好的显色液当天用完，变蓝则不能使用。2 .AA线性范围为：0.01-1.503 .标准曲线线性范围为：(Umg1-20mg1