泌乳素PRL标准操作程序SOP文件.docx

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1、东莞常平医院免疫实验室文件编号：ABCD-02-28泌乳素版序：ABCD页码：第1页，共4页用途：用免疫学方法定量测定人血清或血浆中的泌乳素（Prolactin）含量。电化学发光免疫测定试剂，适用于罗氏Elecsys2010免疫测定分析仪。概述：泌乳素由垂体前叶合成并间歇性分泌，由198个氨基酸组成，分子量约22-23kD0血清中的泌乳素有三种形式：具有生物和免疫活性的单体形式“小”，占多数（80%）；无生物活性的双体形式大，占5-20%；只有低生物活性的四聚体形式大一大，占0.5-5%。泌乳素的靶器官是乳腺，负责其成熟、分化。高浓度泌乳素对卵巢的类固醇生成和垂体促性腺激素的产生和分泌有抑制作

2、用。在怀孕期，受雌激素和孕酮产物升高的影响，泌乳素含量升高，其对乳腺的刺激作用有利于产后哺乳。高泌乳素血症（男性和女性）是生殖紊乱的主要原因。泌乳素测定可诊断无排卵性月经周期。当怀疑乳腺癌和垂体肿瘤时，也可检测泌乳素含量。Elecsys泌乳素测定方法采用二种泌乳素特异的单克隆抗体。试剂R1中含有的生物素化抗体识别泌乳素分子的N-末端，而试剂2中含有的钉标记的抗体可能是识别泌乳素分子的中段。原理：采用双抗体夹心法原理，整个过程18分钟完成。 第1步：10l标本、生物素化的抗泌乳素单克隆抗体和钉（Ru）标记的抗泌乳素单克隆抗体混匀，形成夹心复合物。 第2步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复

3、合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。 第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。 检测结果由机器自动从标准曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。试剂:M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6. 5mlo粒子浓度072mgml,生物素结合能力：470ng生物素mg粒子。含防腐剂。R1：生物素化的抗泌乳素单克隆抗体（灰盖），1瓶，10ml。浓度L6gl,磷酸缓冲液Q05moll, pH7.0o含防腐剂。R2： Ru（bpy）32+标记的抗泌乳

4、素单克隆抗体（黑盖）,1瓶，10ml,浓度0.3mgl,磷酸缓冲液Q05moll, pH7.0o含防腐剂。东莞常平医院免疫实验室版序：ABCD泌乳素页码：第2页，共4页储存和稳定性：存放在2 8度，切莫倒置。未开封，可稳定至标明的保质期。开封后，2-8度12周；放在Elecsys2010上，8周；(使用后放回2 8度；如置20 25度，约20小时)。标本采集和准备：血清：按标准常规方法采集。血浆：肝素锂、钠、镂；EDTA-K3；柠檬酸钠；氟化钠/草酸钾抗凝均可。如采用柠檬酸钠或氟化钠/草酸钾抗凝的血浆，测定结果需+10虬标本在28度可稳定14天,-20度可稳定6个月。只能冻融一次。含沉淀的标本

5、使用前需离心。不要使用加热灭活的标本。标本和质控品禁用叠氮钠防腐。检测步骤：提供的材料：货号：11775952, 100人份的Elecsys泌乳素试剂盒包含: M链霉亲和素包被的微粒 R1生物素化的抗泌乳素单克隆抗体 R2三联毗咤钉标记的抗泌乳素单克隆抗体需要的材料(未提供)： Elecsys泌乳素定标液(CalSet)货号11775987 Elecsys 通用质控品(PreciControl)货号 11731416 Elecsys通用稀释液货号11732277 Elecsys2010 分析仪 Elecsys系统缓冲液(ProCell)货号 11662988 Elecsys 测量池清洗液(Cl

6、eanCell)货号 11662970 Elecsys 添加剂液(SysWash)货号 11930346 Elecsys 系统清洗液支架(Adapter for SysClean)货号933159 Elecsys 2010反应杯(Assay Cup)货号 11706802 Elecsys 2010吸样头(Assay Tip)货号 11706799 Elecsys 系统清洗液(SysClean)货号 11298500方法：按仪器操作说明进行操作。检查试剂与消耗品是否充足。使用前需混匀微粒。仪器通过扫描试剂盒条形码自动输入测试所需的特异性参数，不需手工输入。如果特殊情况下仪器无法阅读条形码，可以手

7、工输入15位数字。将冷藏试剂预温到20度后放置于仪器的试剂盘上，避免产生泡沫。仪器自动控制试剂温度和开/关试剂瓶盖。东莞常平医院免疫实验室文件编号：ABCD-02-28泌乳素版序：ABCD页码：第3页，共4页定标：每批泌乳素试剂有一条形码标签，含有该批试剂定标所需的特殊信息。应用泌乳素CalSet定标液定标。定标频率：每批试剂必须用新鲜试剂（试剂经仪器注册24小时以内）标定一次，如再次标定即根据下列要求： 一个月（同一批号试剂） 7天（放置仪器上的同一试剂盒） 根据要求进行标定：如质控结果超出范围时。质控：Elecsys通用质控品（PreciControl ） 1和2或其它合适的质控品。各浓度

8、区域的质控至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各实验室的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外，应采取校正措施。计算：对每一个标本，仪器会自动计算泌乳素含量，单位为uIUd, ng/ml或MU/L。换算方法是 IUml0. 047=ngml ng/ml21. 2= IUml （mIUl）干扰因素：该方法不受黄疸（胆红素28mgdl）、溶血（血红蛋白lgdl）、脂血（脂质2000mgdl）和生物素100ngml干扰，接受高剂量生物素（5mg天）治疗的病人,至少要等最一次摄入生物素8小时后才能采血。不受类风湿因子干扰（1700Uml）或透析病人标本的干扰。

9、17种常用药物经试验对本测定无干扰。接受过小鼠单抗治疗或体内诊断的病人可能会出现假阳性反应。偶尔可遇到高链霉亲和素抗体的干扰。须注意泌乳素的测定值取决于采血时间，因为泌乳素的分泌呈昼夜的周期性。泌乳素的释放生理性地受吮吸和应激的促进。另外，许多药物（如二苯安定、酚噫嗪）、TRH和雌激素可引起泌乳素升高。多巴胺、L-多巴和麦角胺衍生物抑制泌乳素的释放。有许多文献报道患各种内分泌疾病或怀孕的女性血清中，存在巨分子的泌乳素。各种免疫学检测方法测出的巨分子泌乳素（160kD）的程度也不同。因此高泌乳素血症的检出与否有赖于所用的检测方法。Elecsys泌乳素检测方法也会遇到巨分子泌乳素问题。因此，偶然会

10、有病人标本的泌乳素测定值高于其它方法测出的结果。Elecsys泌乳素测定结果应结合病人病史、临床其他检查结果综合起来进行诊断。东莞常平医院免疫实验室泌乳素版序：ABCD页码：第4页，共4页检测范围:10-10000 IUml或0. 470-470ngml稀释：高于检测范围的标本可用通用稀释液稀释。建议1:10稀释。稀释后的标本泌乳素含量必须高于50uIUml或2.4ngml0如用手工稀释，结果应乘上稀释倍数。如果是机器自动稀释，机器会自动计算结果。正常参考值:n男性116女性87百分位数505-95uIUml18186-39021872-511505-95ng/ml8.54. 1-18.410. 3 3. 4-24. 1各实验室应对各自地区人群的泌乳素正常值波动范围进行调查，如有必要应自己测定一个参考值范围。