新冠核酸检测实验室PCR管八联管滤芯吸头等耗材质检和储存程序.docx

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1、新冠核酸检测实验室PCR管（八联管）滤芯吸头等耗材质检和储存程序1目的保证耗材的使用质量，合理的配用及存放。2适用范围核酸扩增荧光检测实验室常用耗材：离心管；PCR管（八联管）；滤芯吸头；PCR用采血管、采样管、采样拭子和一次性吸管等；无核酸水、PBS等缓冲液。3负责人林永发4购买和储存程序4.1购买前订出计划并定出品名、质量规格报相关部门订货及购买。4. 2购买后，验收合格即领取。4. 3常用的消耗品定点、定量地摆在实验台抽屉里，并标明品名及数量。特殊的消耗品放在指定的地方。4. 4每周用量要有记录，并及时补充及领取所用去的数量。4. 5订购消耗品前，应准确查询数量。5. 6玻璃用品应放在指

2、定位置，存放要小心，以免损坏。5质检程序5.1辅料质检的基本原则5. 11外包装检查:外包装应完整无损无污，标识清楚，检查品名、品牌，货号，规格、生产日期，有效期、保存条件等信息。5. 12.内包装检查：内包装物品应与外包装标识一致，检查是否有破损，泄漏，内容物是否齐全，是否有相应的使用说明书等。5. 13.性能质检:检测试剂耗材是否与其性能一致，比如吸头的准确性和气密性等5. 14.污染物质检:检试剂耗材是否被常规检测项目的待检物污染，这种污染可能是物品生产环节，也可能是运输或实验室的保存过程中被污染。5. 15.抑制物质检:检试剂耗材中是否存在PCR反应的抑制物，比如核酸酶。5. 2辅料质

3、检的前提条件5. 21弱阳性质控：需要准备弱阳性质控，包括标准物质、第三方质控或弱阳性样品用于进行性能质控和抑制物质控。5. 22.阴性质控:需要准各确定阴性的样品或空白对照，用于进行污染物的质控。5. 23重复次数:符合统计学计算的最常用的两个数字是5和20, 5通常是能进行统计学分析的最少重复次数，20通常用于计算95%的置信区间。我科选择重复次数5。5. 3常见辅料的质检辅料的质检应结合实际工作中可能用到的场景，并非越苛刻越好，需要每个实验室结合自身情况来设计和调整参数。我科按以下方式质检。5. 31离心管：（D渗漏密闭性:将5个离心管加入半量墨汁，盖好盖子后放入水中，浸泡30min,没

4、有墨汁渗出为合格。离心密闭性:将5个离心管加入半量纯水，放入离心机，lOOOOrpm, 30min,管盖未崩开未漏液为合格。（3）热密闭性:将5个离心管加入半量纯水，盖好盖子称重后放入金属浴中，56, 30min,再进行称重，离心管未变形，管盖未崩开未漏液，前后重量未变化为合格。（4）冷密闭性:将5个离心管加入半量纯水，放入-20冰箱，24h,离心管未变形，管盖未崩开未漏液为合格。（5）污染物质检:将5个离心管分别加入半量阴性纯水，盖好盖子涡旋lmin后静置5min,吸取纯水作为模板进行扩增，qPCR无扩增为合格。（6）抑制物质检:将5个离心管分别加入弱阳性质控物，室温静置5min,然后进行提

5、取RNA核酸，DNA核酸，室温静置5min,作为模板进行扩增，qPCR扩增未被抑制为合格。5. 32 PCR管（八联管）:（1）渗漏密闭性:将5个PCR管（八联管）加入半量墨汁，盖好盖子后放入水中，浸泡30min,没有墨汁渗出为合格。离心密闭性:将5个PCR管（八联管）加入半量纯水，放入离心机，1000rpm, 30min,管盖未崩开未漏液为合格（3）热密闭性:将5个PCR管（八联管）加入半量纯水，盖好盖子称重后放入PCR仪，设置一个常用的PCR程序，程序运行完毕后，再进行称重，PCR管（八联管）未变形，管盖未崩开未漏液，前后重量未变化为合格。冷密闭性:将5个PCR管（八联管）加入半量纯水，放

6、入20C冰箱，24h,离心管未变形,管盖未崩开未漏液为合格。污染物质检:将5个PCR管（八联管功入半量阴性纯水，盖好盖子涡旋lmin后静置5min,作为模板进行扩增，qPCR无扩增为合格。（6）抑制物质检:将5个PCR管（八联管）分别加入弱阳性质控物，室温静置5min,然后进行提取RNA核酸，DNA核酸，室温静置5min,作为模板进行扩增，qPCR增未被抑制为合格。空白荧光通透性:对于qPCR,需要考察PCR管（八联管）是否有非特异性光信号，将5个空PCR管（八联管），盖好盖子后放入PCR仪，设置一个常用的PCR程序，程序运行完毕后，qPCR无扩增为合格。阳性荧光通透性:对于qPCR,还需要考

7、察PCR管(八联管)是否会抑制荧光的通透性，将5个。含弱阳性样品和扩增试剂的PCR管(八联管)，与确认无荧光干扰的PCR管(八联管)，盖好盖子后放入PCR仪一同扩增，设置一个常用的PCR程序，程序运行完毕后，qPCR扩增未被抑制为合格。5. 33滤芯吸头：测试吸头需使用经校准的移液器。准确性:将5个吸头分别吸取定量的纯水称重，重量与体积的关系按照Ig/mL换算(2)气密性:取5个吸头，吸取最大量程的含有1%甘油的墨水，观察有色液体不出现在滤塞之上，液面相同为合格。(3)防气溶胶性能:取5个吸头，吸取阳性核酸，反复吹吸10次，换另一个新吸头在阴性纯水中反复吹吸10次，取阴性纯水作为模板进行扩增，

8、qPCR无扩增为合格。污染物质检:取5个吸头，吸取阴性纯水反复吹吸10次，取阴性纯水作为模板进行扩增,qPCR无扩增为合格。(5)抑制物质检:取5个吸头，吸取弱阳性质控物反复吹吸10次，然后进行提取;吸取RNA核酸和DNA核酸反复吹吸10次，作为模板进行扩增，qPCR扩增未被抑制为合格。6. 34 PCR用采血管、采样管、采样拭子和一次性吸管等：主要考察污染物和抑制物(D污染物质检:将5个耗材加入一定量阴性纯水，盖好盖子涡旋lmin后静置30min,吸取纯水作为模板进行扩增，qPCR无扩增为合格。(2)抑制物质检:将5个耗材分别加入弱阳性质控物，室温静置30min,然后吸取质控物进行提取;作为模板进行扩增，qPCR扩增未被抑制为合格。7. 35无核酸水、PBS等缓冲液：(DPH值:测量各缓冲液的PH值。(2)污染物质检:吸取缓冲液作为模板进行扩增，qPCR无扩增为合格。抑制物质检:将缓冲液分别与RNA核酸和DNA核酸混合，然后吸取混合液作为模板进行扩增，qPCR扩增未被抑制为合格。经上述检测未发现不合格情况后，即启用该批耗材。8. 引用的图表6. 1 YCXZYY/JYK-JL-S0P_18-7-01附表9:消耗性材料验收记录表